1. 樣品的制備和提取
動物肝組織：
稱?。?±0.05）g 動物肝組織樣品于帶蓋的聚四氟乙烯離心管中，加入15 mL乙酸乙酯，再加入3 mL 10.0%碳酸鈉溶液，以10,000 r/min以上的速度勻質60 s，蓋上蓋子以 5000 r/min 的速度離心2 min，吸取上層有機溶劑于離心管中，在殘渣中再加入10 mL 乙酸乙酯在漩渦混合器上混合1 min。離心后吸取有機溶劑并合并提取液。在收集的有機溶劑中加入5 mL 0.10 mol/mL 的鹽酸溶液，漩渦混合 30 s，以5000 r/min 的速度離心2 min，吸取下層溶液，同樣步驟重復萃取一次，合并兩次萃取液，用 2.5 mol/L NaOH 溶液調節 pH 至5.2。
豬尿樣品：
準確吸取 5.0 mL 樣品于50 mL 離心管中，用乙酸調節 pH 至 5.2后加入 20 mmol/L的 1 mL乙酸銨溶液（pH 5.2）?；炀蠹尤?0 mL乙酸乙酯與異丙醇混合溶劑（6:4），振蕩混合2 min，靜置分層，用滴管收集上層流動相；下層溶液中加入10 mL乙酸乙酯與異丙醇混合溶劑（6:4），振蕩混合2 min，合并兩次萃取液在 60 ℃ 水浴中旋轉濃縮至干，加入 20 mmol/L的2 mL 乙酸銨溶液（pH 5.2），振蕩溶解，作為備用液。
2. 凈化
活化：依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水和5 mL 30 mmol/L 鹽酸潤洗固相萃取柱
上樣：將提取液加入柱中，棄去流出液。流速小于1 mL/min
淋洗：依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗，淋洗液棄去，并將小柱抽干
洗脫：6 mL 4% 氨化甲醇洗脫，收集洗脫液。流速小于1 mL/min
3. HPLC分析