Zenix體積排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 µm硅膠作為填料。3μm的粒徑結合大的孔體積使其成為目前國際上分辨率最高的體積排阻柱。賽分科技獨有的表面鍵合技術保證了填料表面鍵合的最大化,使其具有高的化學穩定性及最小的非特異性吸附。Zenix系列體積排阻柱有100、150及300Å三種孔徑選擇,廣泛的應用于生物分子及水溶性聚合物的分離與分析。
Zenix SEC色譜柱技術參數表
固定相
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Zenix SEC-80 |
Zenix SEC-100
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Zenix SEC-150
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Zenix SEC-300
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材料
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表面鍵合親水薄膜的硅膠 |
表面鍵合親水薄膜的硅膠
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表面鍵合親水薄膜的硅膠
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表面鍵合親水薄膜的硅膠
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顆粒大小
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3 µm |
3 µm
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3 µm
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3 µm
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孔徑 (Å)
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~ 80 |
~ 100
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~ 150
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~ 300
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蛋白分子量范圍
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100 – 50,000 |
100 - 100,000
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500 - 150,000
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5,000 – 1,250,000
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水溶性聚合物分子量范圍
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500 – 5,000 |
500-10,000
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500-25,000
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1,000-100,000
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pH 穩定性
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2 –8.5,短時間可耐pH 8.5-9.5 |
2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5
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2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5
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2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5
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反壓 (for a 7.8x300 mm)
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~ 1,500 psi |
~ 1,500 psi
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~ 1,500 psi
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~ 1,500 psi
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最大耐受壓力 (psi)
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~ 4,500 |
~ 4,500
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~ 4,500
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~ 3,500
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鹽濃度范圍
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20 mM - 2.0 M |
20 mM - 2.0 M
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20 mM - 2.0 M
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20 mM - 2.0 M
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最高使用溫度 (oC)
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~ 80 |
~ 80
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~ 80
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~ 80
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流動相的兼容性
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常規水相及有機相溶劑 |
常規水相及有機相溶劑
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常規水相及有機相溶劑
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常規水相及有機相溶劑
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● 3 μm粒徑
● 100、150、300 Å的孔徑選擇
● 極高的分離效率和分辨率
● 高容量
● 在低和高鹽濃度下有高穩定性
● 批間重復性
● 高的蛋白回收率而不破壞生物活性
● 可忽略的非特異性反應
● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒類生物分子能實現理想的分析和分離
● 自然多聚體(如:多糖)、合成多聚體和納米材料(如:納米顆粒)能夠實現理想的分析和分離
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最高的分辨率
開發小粒徑填料的優勢在于能實現更高的分離效率和分辨率。當粒徑從5 μm降至3 μm時,柱效幾乎為原先的兩倍。如圖1和表1所示:當填料粒徑從5 μm降至3 μm時,BSA二聚體、BSA、核糖核酸酶A的塔板數分別從2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。圖2和表2進一步表明3 μm Zenix柱在分離各種蛋白時能實現更高的分離效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm長的Zenix柱時能夠達到40,000的塔板數。
圖1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分離蛋白混合物A

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色譜柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流動相: 150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 7.8x300 mm為1.0 mL/min; 4.6x300 mm為0.35 mL/min
溫度: 室溫(~23℃);
檢測器: UV 214 nm
進樣量: 10 μL (4.6x300 mm為3 μL)
樣品: 1) 甲狀腺球蛋白(1.0 mg/mL), 670 kD; 2) BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/mL), 66 kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶(2.5 μg/mL), 120 D
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表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率
峰
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蛋白
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Zenix 300
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Zenix 300
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SRT 300
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(4.6x300)
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(7.8x300)
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(7.8x300)
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1
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甲狀腺球蛋白
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2180
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1730
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1120
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2
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BSA二聚體
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4390
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4600
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2720
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3
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BSA
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10280
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13090
|
6590
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4
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核糖核酸酶A
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16490
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22000
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11160
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5
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尿嘧啶
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33640
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38500
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27860
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圖2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率 (內徑為7.8 mm)
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色譜柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流動相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
反壓: Zenix SEC-300為1,375 psi, Zenix SEC-150為1,100psi
溫度: 室溫(~ 23℃)
檢測波長: 214 nm
進樣量: 10 μL
樣品: 1)甲狀腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D.
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表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率
峰
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蛋白
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Zenix 150
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Zenix 300
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1
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甲狀腺球蛋白
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18050
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2460
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2
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BSA二聚體
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2420
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5110
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3
|
BSA
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5620
|
13090
|
4
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核糖核酸酶A
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17600
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22000
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5
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尿嘧啶
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42000
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38500
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高載樣量
載樣量是衡量體積排阻色譜柱性能的重要指標之一,下圖表明Zenix系列分析色譜柱在BSA上樣量高達500 µg的情況下,仍保持著完美的分析峰形。
圖3. Zenix SEC-150 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜

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色譜柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
進樣量: 10 µL
檢測器: UV 214 nm
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圖4. Zenix SEC-300 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜
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色譜柱: Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
進樣量: 10 µL
檢測器: UV 214 nm
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高穩定性
賽分科技獨有的表面修飾技術使得硅膠表面的鍵合密度達到最大化,從而阻止了能夠促進鍵合相脫落的溶劑分子向薄膜內側的擴散,保證了其在pH 2-8.5范圍的穩定使用。Zenix體積排阻柱適用于大多數水性及有機溶劑,包括:醋酸、磷酸、Tris緩沖鹽體系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等,同時可耐受高鹽溶液,如2.0 M的NaCl。
流動相的兼容性
Zenix SEC固定相能與大多水相緩沖液兼容,如醋酸銨、磷酸鹽、Tris等。Zenix SEC固定相能夠承受高濃度鹽,如2.0 M。同時Zenix SEC柱在有機溶劑中,如甲醇、乙醇、四氫呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亞砜等,水和有機溶劑混合相中均能保持穩定。
高蛋白回收率
Zenix SEC固定相為親水性和中性,蛋白和其他生物分子與固定相之間的非特異性吸附可忽略??梢种频鞍孜降焦枘z固定相表面的作用,從而能夠實現蛋白高的回收率,在分離后能夠保持蛋白的活性。酸性和堿性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能夠高于95%。
Zenix SEC柱使用手冊(中文、English)